Effet d’un extrait de thé Hao Ling® (Camellia sinensis) sur l’activité antioxydante et hépatoprotectrice sur une culture primaire d’hépatocytes de rat

Dans cette étude, nous avons étudié les effets hépatoprotecteurs et antioxydants de l’EGCG et d’un extrait de thé Hao Ling^® (PTE) sur une culture primaire d’hépatocytes de rat afin d’évaluer si un extrait de thé global présentaient des effets bénéfiques supérieurs par rapport à l’EGCG seule.

Introduction

Le stress oxydatif est reconnu comme étant un facteur de risque majeur dans la survenue des maladies cardiovasculaires et intervient dans la pathogenèse de la stéatose hépatique non alcoolique.

Le thé est une source importante de composés phénoliques qui sont de puissants antioxydants. L’épigallocatéchine-3-gallate (EGCG), catéchine la plus abondante dans le thé, a été décrite comme porteuse principale des propriétés anti-oxydantes du thé.

Conclusion

Le but de cette étude était d’évaluer les effets hépato-protecteur et l’activité antioxydante d’un extrait de thé Hao Ling (PTE) (Camellia sinensis) par rapport à l’épigallocatéchine-3-gallate (EGCG) seule.

Nous avons d’abord démontré que le thé Hao Ling présentait une forte activité anti-oxydante via le test chimique DPPH. Nous avons ensuite étudié les effets du thé Hao Ling et de l’EGCG, catéchine majoritaire de l’extrait, contre la mortalité et le stress oxydatif induits par le TBHP, puissant oxydant. Ces expériences ont permis de mettre en évidence que l’extrait de thé Hao Ling protégait les hépatocytes contre la mortalité induite par le TBHP. En revanche, l’EGCG seule n’a pas permis une telle protection. Les résultats montrent également que thé Hao Ling présente une forte activité antioxydante en diminuant l’anion superoxide contenu dans les hépatocytes à l’état basal, mais également suite aux traitements de TBHP. En outre, l’altération de l’activité mitochondriale induite par TBHP a été prévenue par le thé Hao Ling alors que l’EGCG seule n’a pas démontré d’activité antioxydante et n’a pas empêché l’altération de l’activité mitochondriale contre le TBHP.

Ces résultats indiquent que le thé Hao Ling présente des effets antioxydants et hépato-protecteurs plus important que l’EGCG seule et à une concentration comparable à la dose trouvée dans l’extrait. Ceci suggère que l’EGCG n’est pas impliquée seule dans les propriétés antioxydantes du thé et peut agir en synergie avec d’autres composés. Avec des données complémentaires in vivo pour soutenir cette étude, le thé Hao Ling peut être considéré comme bénéfique dans l’inhibition du stress oxydatif.

 L. Braud^*,1, L. Peyre², G. de Sousa², R. Rahmani², JM. Maixent¹

1. Equipe de biologie moléculaire marine (EB2M), Université de Toulon, BP20132, Avenue de l’Université, 83957 La Garde, France
2. Cell & Molecular Toxicology of Xenobiotics (CMTX), INRA Unit 1331, Sophia Antipolis

Antioxidant and protective effects of a pu-erh tea extract (camellia sinensis) on primary cultured rat cells

Oxidative stress is recognized to be implicated in the pathogenesis of cardiovascular and non-alcoholic fatty liver diseases. It is well know that tea is a rich source of phenolic compounds known for their antioxidant activity.

Consequently, the antioxidant and protective effects of phenolic compounds from a pu-erh tea extract (PTE) was evaluated on primary culture of rat hepatocytes. PTE was quantified for its composition in catechins and polyphenol content by HPLC analysis. The antioxidant capacity of tea products was determined using TAC and DPPH assay methods. Then, antioxidant and hepatoprotective effects were determined by pretreating hepatocytes during 4h with various concentrations of PTE (25, 50 and 100μg/ml), epigallocatechin-3-gallate (EGCG) as major catechin of PTE (12μM corresponding to 100μg/ml (PTE) and N-acetylcystein (NAC) (0.1 and 1mM) as an antioxidant reference.

Then, cells were stressed for 1h with 150μM tert-Butyl hydroperoxide (TBHP). Viability was determined by real time cellular impedance and MTT assays. Oxidative stress was measured by CellRox, MitoSox and TMRE stainings and evaluated by fluorescence microscopy on an ArrayScanXTI high Content Analysis Reader (Cellomics Inc.). We found that TBHP induced oxidative stress (+1.5 fold increase vs control) was prevented by PTE pretreatment (+1.07 fold increase vs ctrl) and EGCG (+1.1 fold increase vs ctrl). We also demonstrated that PTE pretreatment protected rat hepatocytes (–28% mortality relative to TBHP) against TBHP induced mortality (+23% mortality relative to ctrl). However, EGCG did not prevented death in the same proportion than PTE (–9% mortality relative to TBHP).

In this study, we reported that PTE pre-exposure prevented oxidative stress and mortality induced by TBHP. Moreover, we reported here that PTE has higher antioxidative and protective effects than EGCG alone, well known for its antioxidant effects, which means that EGCG may act in synergy with other PTE components.

Source : Braud, Laura; Peyre, Ludovic; De Sousa, Georges; Armand, Martine; Rahmani, Roger; Maixent, Jean-Michel. 2015. « Effect of Brewing Duration on the Antioxidant and Hepatoprotective Abilities of Tea Phenolic and Alkaloid Compounds in a t-BHP Oxidative Stress-Induced Rat Hepatocyte Model. » Molecules 20, no. 8: 14985-15002.